小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）酶聯(lián)免疫檢測試劑盒

簡要描述：小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）酶聯(lián)免疫檢測試劑盒適用于體外定量檢測小鼠血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中天然和重組丙酮酸激酶M2型同工酶（M2-PK）的濃度。本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!

產(chǎn)品型號： 96t/48t

所屬分類：Mouse/小鼠ELISA試劑盒

更新時(shí)間：2024-12-21

小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒（靈敏性高 、特異性強(qiáng) 、重復(fù)性好）采用酶聯(lián)檢測抗體包被法，質(zhì)量好價(jià)格高，檢測步驟多，出結(jié)果時(shí)間較長；*快遞。

規(guī)格96T/48T

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特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

服務(wù)：所有的elisa試劑盒均免費(fèi)代測，全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。

小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)方案：

一，ATP誘導(dǎo)激活的表達(dá)

1）收集人的單核細(xì)胞THP-1，加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基RPMI1640，37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)細(xì)胞使其濃度達(dá)到106/ml，再加入1ml RPMI1640培養(yǎng)基，過夜培養(yǎng)。

2）過夜培養(yǎng)12h的細(xì)胞，加入終濃度為1ug/ml的LPS，刺激培養(yǎng)3h后，小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒再次加入終濃度為5mM的ATP溶液（100mM，pH =7）激活培養(yǎng)2h。

二，THP-1細(xì)胞上清及內(nèi)含物的收集

培養(yǎng)好的細(xì)胞，收集細(xì)胞上清及細(xì)胞。對于上清液，1000g離心20分鐘，將上清用于后續(xù)的含量檢測。細(xì)胞內(nèi)含物，先用預(yù)冷的PBS洗3次，用物理（超聲破粹或者反復(fù)凍融）或者化學(xué)方法（細(xì)胞裂解液）裂解細(xì)胞，1000g離心20分鐘，取上清進(jìn)行檢測。

三，定量檢測

小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)酶聯(lián)免疫檢測試劑盒分別取上清溶液，使用酶聯(lián)免疫檢測試劑盒定量檢測樣本中的含量。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

ATP及LPS處理THP-1細(xì)胞后，細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液中的的表達(dá)量如圖2所示：

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